दोहरे तरंग दैर्ध्य सेटिंग के मामले में, हस्तक्षेप करने वाले पदार्थों के प्रकाश में आम तौर पर प्रकाश बिखरने और गैर-विशिष्ट प्रकाश अवशोषण होता है, इसलिए मुख्य तरंग दैर्ध्य और उप-तरंग दैर्ध्य सेट करना आवश्यक है, और मुख्य तरंग दैर्ध्य विशेषता अवशोषण शिखर है। पदार्थ का परीक्षण किया जाना है। उप-तरंग दैर्ध्य सेटिंग का सिद्धांत यह है कि मुख्य तरंग दैर्ध्य पर हस्तक्षेप करने वाले पदार्थों का अवशोषण उप-तरंग दैर्ध्य के अवशोषण के जितना संभव हो उतना करीब है। वही अवशोषण शिखर, इसलिए यह हीमोग्लोबिन के हस्तक्षेप को समाप्त कर सकता है। इसलिए, व्यतिकरण के प्राथमिक तरंगदैर्घ्य और द्वितीयक तरंगदैर्घ्य जितने करीब होंगे, उतना ही बेहतर होगा।
मापन आवश्यकताएं
1. नमूना: सीरम, मूत्र, मस्तिष्कमेरु द्रव, आदि।
2. अभिकर्मक: एकल अभिकर्मक, दोहरा अभिकर्मक
3. दोहरी तरंग दैर्ध्य: मुख्य तरंग दैर्ध्य और उप-तरंग दैर्ध्य से बना दो तरंग दैर्ध्य। पता लगाने की प्रक्रिया में हस्तक्षेप को समाप्त किया जा सकता है।
4. अंशशोधक (मानक): अज्ञात नमूनों की सांद्रता की तुलना करें
5. गुणवत्ता नियंत्रण सामग्री: जैव रासायनिक उपकरण के दैनिक कार्य में उपकरणों, अभिकर्मकों आदि की स्थिति की निगरानी के लिए उपयोग किया जाता है।
तरीका
1. अंत-बिंदु विधि (अंतिम) पूरी तरह से उत्पादों में परिवर्तित हो जाती है, और प्रतिक्रिया अब अंतिम बिंदु तक पहुंचने के लिए नहीं की जाती है, और परीक्षण किए गए पदार्थ की एकाग्रता की गणना करने के लिए प्रतिक्रिया अंत बिंदु का अवशोषण लिया जाता है। जैव रासायनिक परीक्षणों में, एंजाइम, बीयूएन और सीआरई को छोड़कर, पता लगाने के लिए अंत-बिंदु विधियों का उपयोग किया जाता है।
1) । एक-बिंदु अंत बिंदु विधि: एक बिंदु का अवशोषण लें जब प्रतिक्रिया परिणाम की गणना करने के लिए अंतिम बिंदु तक पहुंच जाए।
2))। दो-बिंदु समापन बिंदु विधि: प्रतिक्रिया शुरू होने से पहले एक बिंदु का अवशोषण लें, और फिर दूसरे बिंदु का अवशोषण लें जब प्रतिक्रिया अंतिम बिंदु तक पहुंच जाए। दूसरे बिंदु पर अवशोषण घटाकर पहले बिंदु पर अवशोषण घटाकर परिणाम की गणना करें। मुख्य रूप से अभिकर्मकों और नमूना रिक्त स्थान को घटाने के लिए उपयोग किया जाता है। परिणामों की सटीकता की गारंटी दें। आम तौर पर डबल अभिकर्मकों के लिए उपयोग किया जाता है।
2. निश्चित समय विधि (दो-बिंदु विधि): परिणाम की गणना करने के लिए प्रतिक्रिया में अभी भी दो बिंदुओं के बीच के अंतर को लेना है। ये दो बिंदु प्रतिक्रिया के न तो प्रारंभिक बिंदु हैं और न ही अंत बिंदु। मुख्य रूप से कुछ गैर-विशिष्ट वस्तुओं का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, जैसे क्रिएटिनिन।
3. सतत निगरानी विधि (गतिज विधि, दर विधि): एंजाइम गतिविधि या एंजाइम मेटाबोलाइट्स को मापते समय, परिणाम की गणना करने के लिए प्रतिक्रिया वक्र में रैखिक रूप से परिवर्तन करने वाले अवशोषण मान (△; ए / मिनट) को लगातार लिया जाता है। इसे शून्य-क्रम प्रतिक्रिया भी कहा जाता है क्योंकि रैखिक प्रतिक्रिया समय के दौरान बिंदुओं के बीच अवशोषण अंतर शून्य होता है।
